Ele era pastor e, aos 15 anos, ingressou no noviciado dos frades capuchinhos em Morcone, Itália, ingressando na ordem aos 19 anos. Ele sofreu vários problemas de saúde e, a certa altura, sua família pensou que ele tinha tuberculose. Ele foi ordenado aos 22 anos em 10 de agosto de 1910

.

Enquanto orava diante de uma cruz, ele recebeu os estigmas em 20 de setembro de 1918, o primeiro padre a ser tão abençoado. À medida que a notícia se espalhou, especialmente depois que soldados americanos trouxeram para casa histórias do Padre Pio após a Segunda Guerra Mundial, o próprio padre se tornou um ponto de peregrinação tanto para os piedosos quanto para os curiosos. Ele ouvia confissões por hora. Em 1956, ele fundou a Casa para o Alívio do Sofrimento, um hospital que atende 60.000 por ano. Na década de 1920, ele iniciou uma série de grupos de oração que continuam até hoje com mais de 400.000 membros em todo o mundo. Ele morreu em 23 de setembro de 1968 em San Giovanni Rotondo, Foggia, Itália,

de causas naturais.

Seu milagre de canonização envolveu a cura de Matteo Pio Colella, 7 anos, filho de um médico que trabalhava na Casa para o Alívio do Sofrimento. Na noite de 20 de junho de 2000, Matteo foi internado na unidade de terapia intensiva do hospital com meningite. Pela manhã, os médicos haviam perdido a esperança nele, pois nove dos órgãos internos do menino haviam deixado de dar sinais de vida. Naquela noite, durante uma vigília de oração com a presença da mãe de Matteo e de alguns frades capuchinhos do mosteiro de Padre Pio, a condição da criança melhorou repentinamente. Quando acordou do coma, Matteo disse que viu um homem idoso com barba branca e um longo hábito marrom, que lhe disse: “Não se preocupe, você logo estará curado”. O milagre foi aprovado pela Congregação e pelo Papa São João Paulo II em 20 de dezembro de 2001

.